Evaluación de marcadores de agotamiento celular en toxoplasmosis ocular

Abstract

Introducción: La toxoplasmosis ocular (TO) es la causa más común de uveítis posterior y en algunos países, es una de las causas más importantes de discapacidad visual siendo en Suramérica más severa que en otros continentes. La TO se caracteriza por frecuentes reactivaciones debido a quistes tisulares remanentes en la retina después de la infección inicial con T. gondii. Respecto a la fisiopatología de las células T CD8, se ha informado en ratones con toxoplasmosis crónica, la pérdida de la función efectora y capacidad proliferativa de estas células T CD8 junto con la alta expresión de los receptores inhibidores PD-1, CD244, LAG-3 y CD160 que conducen a la reactivación de la infección. Sin embargo, hasta el momento no se han identificado los posibles factores inmunológicos humanos asociados con la TO, ni se ha evaluado los niveles de receptores inhibidores (iRs) en la toxoplasmosis ocular. Metodología: en este estudio detectamos y caracterizamos los marcadores de agotamiento celular PD-1, CD244, LAG-3 y CD160 en células T CD8 totales y subpoblaciones celulares de memoria (central y periférica) de individuos con toxoplasmosis ocular. Se evaluaron cinco individuos por cada grupo seleccionado (crónicos sin lesiones oculares, con lesiones oculares y seronegativos para Toxoplasma) la expresión génica de estos marcadores se observó utilizando qRT-PCR y citometría de flujo. Resultados: Se encontró que la expresión de estos genes estaba elevada en los individuos con TO principalmente. De manera interesante, el marcador por excelencia del fenómeno de agotamiento celular PD1, se encontró 10 veces más elevado en los individuos con TO respecto a los asintomáticos y 3,5 veces mayor para el marcador CD244 en este mismo grupo. Por el contrario, el marcador LAG-3 fue el menos expresado en todos los grupos. Respecto a los Página 3 de 120 porcentajes de células positivas por citometría y de la cantidad de moléculas por célula MFI, estos marcadores variaron notablemente entre las subpoblaciones celulares. Es posible observar una disminución en el porcentaje de células positivas para los marcadores PD1 y CD244 en el grupo ocular y un aumento de la cantidad de moléculas expresadas por célula en este mismo grupo. LAG-3 y CD160 no presentaron dichas variaciones en su expresión. Así mismo, no encontramos diferencias en las subpoblaciones de memoria para ningún marcador. De manera llamativa, encontramos una correlación positiva entre el índice de relación MFI/porcentaje celular y el número de lesiones oculares para el marcador PD1. Conclusión: En conjunto, nuestros resultados sugieren la expresión de múltiples iRs principalmente PD1 seguido de CD244, denotado por el MFI, lo que sugiere un posible fenotipo de agotamiento parcial, previamente descrito en otras infecciones crónicas. Si bien el paradigma del agotamiento de CD8+ se ha explorado ampliamente en los modelos virales crónicos, apenas está comenzando a desarrollarse en las infecciones parasitarias.